糖原PAS过碘酸雪夫染色试剂盒说明书

点击下载日期：2014/2/21 10:38:37

一、糖原PAS过碘酸雪夫染色试剂盒简介
糖原染色是病理学中常规的染色方法之一，McManus在1946年最先使用高碘酸-雪夫技术显示黏蛋白，该法常用来显示糖原和其他多糖，该染色液不仅能够显示糖原，还能显示中性黏液性物质和某些酸性物质，以及软骨、垂体、霉菌、真菌、色素、淀粉样物质、基底膜等。
过碘酸（又称高碘酸）是一种强氧化剂，它能氧化糖类及有关物质中的1，2-乙二醇基，使之变为二醛，醛与Schiff试剂能结合成一种品红化合物，产生紫红色。由于高碘酸还可氧化细胞内其他物质，使用时应注意选择好高碘酸浓度和氧化时间，使氧化控制在即能把乙二醇基氧化成醛基，又不至于过氧化，这是很关键的步骤。
本糖原PAS染色试剂盒的特点: 采用Leagene特有配方技术，大大增强了染色效果；性能稳定，特异性强；操作简捷，仅需1h左右。
二、糖原PAS过碘酸雪夫染色试剂盒组成
试剂(A): 过碘酸溶液 50ml 100ml 500ml 4℃ 避光
试剂(B): Schiff Reagent 50ml 100ml 500ml 4℃ 避光
试剂(C): Lillie-Mayer苏木素染色液 50ml 100ml 500ml RT 避光
试剂(D): 酸性乙醇分化液 50ml 100ml 500ml
三、糖原PAS过碘酸雪夫染色试剂盒主要成分：
试剂(A): 主要由过碘酸等组成。
试剂(B): 主要由碱性品红、偏重亚硫酸钠等组成。
试剂(C): 主要由苏木素、乙醇等组成。
试剂(D): 主要由稀酸、乙醇等组成。
自备材料：
1、10%的福尔马林
蒸馏水或去离子水
3、95%乙醇
4、无水乙醇
5、封片剂
四、糖原PAS过碘酸雪夫染色试剂盒操作步骤（仅供参考）
1、常规固定，常采用10%的福尔马林，常规脱水包埋。
2、石蜡切片脱蜡入蒸馏水；冰冻切片直接入蒸馏水。
3、自来水冲洗2～3min，再用蒸馏水浸洗2次。
4、置于过碘酸溶液中，室温放置5～8min，一般不宜超过10min.
5、自来水冲洗1次，再用蒸馏水浸洗2次。
6、样本放入Schiff Reagent，置于室温阴暗处，浸染10～20min。
7、自来水冲洗10min。
8、样本置于Lillie-Mayer苏木素染色液中，染细胞核1～2min。
9、酸性乙醇分化液分化。
10、自来水冲洗10～15min后，更换双蒸水清洗，使其返蓝。
11、逐级常规乙醇脱水。
12、二甲苯透明。
13、中性树胶封固。
五、糖原PAS过碘酸雪夫染色试剂盒染色结果：
PAS反应阳性物质（糖原或多糖）红色或紫红色
细胞核蓝色
细胞质深浅不一的红色
备注：颜色深浅很大程度上取决于样品在过碘酸溶液和Schiff Reagent中作用时间的长短。

阴性对照(可选)：
1、对照切片可以用唾液，取唾液片（过滤后用）处理30～60min后，与其他切片共同入过碘酸溶液。
2、对照片可以淀粉酶，取淀粉酶1g于双蒸水或PBS(pH5.3) 100ml，处理30～60min后，与其他切片共同入过碘酸溶液。
3、如果对照片采用其自身样本，对照片不经过碘酸溶液这一步，直接入Schiff Reagent。染色结果：对照片呈阴性反应，无紫红色颗粒。
六、注意事项：
1、切片脱蜡应尽量干净，否则影响染色效果。
2、过碘酸氧化时间不宜过久，氧化时的温度以18～22℃最佳。
3、试剂(A)、 (B)应置于4℃密闭保存，使用时避免接触过多的阳光和空气。使用前，最好
提前30min取出恢复到在室温后，避光暗处使用。
4、酸性乙醇分化液应经常更换新液，其分化时间应该依据切片厚薄、组织的类别和酸性乙
醇分化液的新旧而定，另外分化后自来水冲洗时间应该足够。
5、在过碘酸溶液和Schiff Schiff Reagent中作用时间非常重要，该依据切片厚薄、组织
的类别等决定。
6、本试剂盒常用于常规组织切片染色，对于真菌、细胞、极其薄的切片，建议采购糖原PAS染色试剂盒（细胞真菌专用）, 因为其过碘酸溶液和苏木素溶液浓度更低，不宜过染。 7、冷冻切片染色时间尽量要短。
8、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
七、有效期： 6个月有效。