中性红染色液

点击下载日期：2013/11/8 10:29:03

一、中性红染色液简介：
中性红是一种弱碱性pH 指示剂，变色范围pH6.4～8.0之间(由红变黄)。分子式：C15H16N4•HCl，分子量：288.78。在中性或微碱性环境中，植物的活细胞能大量吸收中性红并向液泡中排泌，由于液泡在一般情况下呈酸性反应，因此，进入液泡的中性红便解离出大量阳离子而呈现樱桃红色，在这种情况下，原生质和细胞壁一般不着色；死细胞由于原生质变性凝固，细胞液不能维持在液泡内，因此，用中性红染色后，不产生液泡着色现象，相反，中性红的阳离子，却与带有一定负电荷的原生质及细胞核结合，而使原生质与细胞核染色。
中性红染色液(Neutral Red stain)是一种组织或细胞染色时常用的可以把细胞核染成红色的染色液。本染色液常用于组织或细胞染色中细胞核的红色复染。
二、中性红染色液组成：
Neutral Red stain (0.1%) 100ml 500ml ，主要成分：主要由中性红、去离子水等组成。
自备材料：
1、4%的多聚甲醛，亦可采购森贝伽公司的多聚甲醛溶液(4% PFA)(DF0135)
2、蒸馏水
3、不同浓度的乙醇
三、操作步骤（仅供参考）：
1. 样品处理
a) 对于石蜡切片：二甲苯中脱蜡5～10min。换用新鲜的二甲苯，再脱蜡5～10min。
无水乙醇5min。 90%乙醇2min。 70%乙醇2min。蒸馏水2min。
b) 对于冰冻切片：蒸馏水2min。
c) 对于培养细胞：
用4%多聚甲醛固定10min以上。蒸馏水洗涤2min。
换用新鲜的蒸馏水，再洗涤2min。
2. 中性红染色
a) 对于上述处理好的样品，用Neutral Red stain (0.1%)染色2～5min
b) 用蒸馏水或自来水充分洗涤。
c) 进行观察和拍照。
四、注意事项：
1、如果需要脱水、透明和封片处理，还需自备二甲苯，中性树胶或其它封片剂。如果样品
是石蜡切片，需自备70%和90%乙醇，无水乙醇以及二甲苯。
2、首次使用本试剂时建议先取1~2个样品做预实验。
3、中性红染色液可以根据染色结果和要求调整时间。
4、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
五、有效期： 12个月有效。

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