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DAPI染色液(5μg/ml)使用说明书

点击下载日期:2014/4/29 9:30:16

DAPI染色液简介:
DAPI细胞染色液(DAPIStainingSolution)是适用于常见细胞和组织细胞核染色的染色液。DAPI,即2-(4-Amidinophenyl)-6-indolecarbamidinedihydrochloride,也称DAPIdihydrochloride,分子式为C16H15N5·2HCl,分子量为350.25。可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料,和双链DNA结合后可以产生比DAPI自身强20多倍的荧光,灵敏度高于EB。
DAPI染色常用于细胞凋亡检测,染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。DAPI也常用于普通的细胞核染色以及某些特定情况下的双链DNA染色。DAPI的最大激发波长为340nm,最大发射波长为488nm,DAPI和双链DNA结合后,最大激发波长为364nm,最大发射波长为454nm。本DAPI染色液可以直接用于固定细胞或组织的细胞核染色,亦可以按照具体实验要求,稀释到相应浓度后进行染色。一般推荐工作浓度为0.5ug~10ug/ml。

DAPI染色液组成:
DAPIStainingSolution(5μg/ml) 10ml/50ml -20℃避光

主要成分:主要由DAPI、溶剂、防腐剂等组成。
自备材料:
荧光显微镜
蒸馏水
微量移液
PBS或生理盐水

DAPI染色液操作步骤(仅供参考):
对于细胞或组织样品,固定后冲洗去除固定剂。随后如果需要进行免疫荧光染色,则先进行免疫荧光染色,染色完毕后再按后续步骤进行DAPI染色,如果不需要进行其它染色,则直接进行后续的DAPI染色。对于贴壁细胞或组织切片,加入少量DAPI染色液,覆盖住样品即可。对于悬浮细胞,至少加入待染色样品3倍体积以上的DAPI染色液,混匀。
室温放置5~8min。
3.轻轻吸取DAPI细胞染色液。
4、用无菌的PBS或生理盐水清洗2~3次,每次3~5min。5.直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。
染色结果:细胞发生凋亡时,会看到凋亡细胞的细胞核呈致密浓染,或呈碎块状致密浓染。

注意事项:
DAPI染色液的浓度适用于各种常规染色的需要。
荧光染料都存在淬灭的问题,建议染色后尽快检测。
为减缓荧光淬灭,可以使用抗荧光淬灭封片液。
4、避免反复冻融,否则容易失效。
5、DAPI对人体有一定刺激性,请注意适当防护。
6、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

有效期:6个月有效。
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