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标准级再生纤维素(RC)透析膜说明书

点击次数:6989  日期:2017/12/8 11:24:15

基本概述
标准级再生纤维素(RC)膜由从棉绒纤维再生的天然纤维素制造。这些RC膜不带固定电位,且不会吸附绝大多数溶质。标准级RC透析膜可用于温和的实验室透析功能,例如,脱盐、缓冲液置换或分子分离。
这些柔韧、透明的膜具有良好的化学和PH(2–12)抗性和极高的温度耐受性(推荐温度60℃),不同的MWCO规格之间无显著差异。标准级再生纤维素(RC)膜含有极低水平的重金属和硫化物,不需要特殊的清洗处理。
膜渗透性特征
描述透析膜最广泛使用的指征即截留分子量(MWCO)。我们鉴定膜MWCO时使用已知分子量的溶质透析17小时,MWCO定义为该试验中被截留至少90%的最小溶质的分子量(即最小溶质透过率为10%或以下)。
透析膜也可以渗透性物质通过膜的速率来定性区分。速率试验中,将含有渗透性物质的溶液置于膜的一侧,纯溶剂置于另一侧。如果溶液和溶剂均充分搅拌,纯溶剂不断更换(以使其中不含有相当浓度的溶质),即可得到一级速率。
影响透析速率的一个重要变量即为溶质的分子量。随着渗透性溶质分子量的增加,透析速率降低。当分子量与膜MWCO相差较大时,速率的降低是由分子量的增加所导致的扩散速率降低所引起的。当溶质的分子量与膜MWCO接近时,随着分子量增加,速率会显著降低,直到最后,由于分子量太大而不能通过膜。
MWCO 选择
大多数溶质分子的有效尺寸会受其所溶溶液的pH值和离子强度的影响。因此,所列MWCO值仅作为一般参考,不作为绝对值。在对各种应用选择最优MWCO时,有必要使用多种膜进行测试。为使透析速率最大化,选择使用的膜应具有最大的MWCO,且不会导致所需物质的大量损失。
MWCO的选择主要取决于需要截留在膜内的大分子的分子量(MW),以及需要清除的小分子污染物的分子量。要通过膜透析的方式进行有效的分离,两种待分离物质之间的分子量比例至少应为25。关于选择MWCO的经验方法是,MWCO选择为截留大分子MW的一半,已达到至少90%的截留。
膜扁平宽度选择
膜扁平宽度的选择主要取决于样品体积和透析容器的大小。较小的膜(具有较高的表面积/容积比)透析较快,而较大的膜由于扩散距离较长,透析较慢。为使膜操作更加简单,推荐总长度应约为10-15cm(包括膜夹和顶部空间)。产品目录和包装上提供“容积/长度“比(ml/cm)数据。
膜夹选择
推荐使用膜夹宽度应比膜管扁平宽度长4-10mm。此时,样品溶液充满膜管内部,膜夹亦可牢固地密封膜管。膜夹共有2种材料规格:聚丙烯或尼龙(通用型)。聚丙烯膜夹可高压灭菌,推荐用于RC膜。共有3种规格聚丙烯膜夹可选:标准膜夹,配重膜夹,磁性配重膜夹。
尼龙膜夹可用于所有类型的透析膜管。这些通用型膜夹可自动下沉,膜管借助顶部空间垂直漂浮。通用型膜夹不可高压灭菌。
膜储存方法和保存期限
干型膜可在室温或4℃条件下储存于聚乙烯袋内。未开封的预湿型膜储存于4℃。一旦湿润,膜应浸没于以下一种溶液中:0.05% 叠氮化钠,1%苯甲酸钠或1%甲醛中。注意:一旦湿润,膜不应再干燥。干燥可能导致膜孔结构不可逆的塌陷。一般储存条件下,膜的保存期限为两年。
膜灭菌
膜灭菌的常规方法是使用环氧乙烷(EtO)气体。也可以使用伽马辐照或蒸汽高压。我们不推荐对再生纤维素膜进行煮沸或蒸汽高压处理。温度高于60℃可能会改变膜结构,导致灭菌后渗透性能降低。蒸汽灭菌后的RC膜应进行鉴定测试,以确认渗透性能或MWCO的没有变化。膜可以在121℃条件下浸于灭菌水中高压不超过15分钟(循环时间应尽可能短)。
膜处理和使用(仅供参考)
下述步骤为常规透析的一般程序。开始透析样品前,需要考虑多个变量参数,其中影响透析速率的参数包括:样品溶剂、膜相容性、膜MWCO、透析溶剂、透析液体积、温度等。因此,针对某些特殊的透析应用,可能需要对透析程序做一定的优化。对于大多数应用,透析膜可于室温浸于蒸馏水中30min,以去除防腐剂(甘油或叠氮化钠),然后再用蒸馏水彻底冲洗膜。
1. 在透析容器内装入大量合适的透析液(缓冲液)。透析液体积应为样品体积的100倍。(例如,透析10ml样品需要使用1L透析液。)
2. 剪一段合适长度的透析膜管。预留一小段长度作为顶部空间(约为总样品体积的10%),这样可确保透析袋漂浮,不被旋转搅拌棒损坏。请按照使用指南准备膜管。
3. 松开安全锁,打开膜夹。将膜管插入到打开的膜夹,重新夹上,约3-5mm膜管伸出膜夹。
4. 将样品从打开的一端装入透析膜管。调整顶部空间的长度,夹上膜夹。
5. 将透析样品置于合适的透析缓冲液中。
6. 在透析容器内放置一根干净的磁力搅拌棒。确保搅拌棒足够大,以完全搅动透析液,但同时应能自由旋转。将透析容器置于搅拌器上。调整最大转速,保证漩涡不会下拉样品。
样品回收
抓住从膜夹伸出部分膜管,松开膜夹。倒出样品,或用巴斯德吸管或注射器吸出样品。使用24-计量型皮下注射针头小心刺穿膜管并吸取可回收极小量样品。
透析通常可过夜进行。在透析过程中,透析液可更换数次。最后一次透析液更换后,应继续透析至少2-4小时。
注意:对于高浓度污染物,可能需要更长的透析时间,透析液更换的次数也需要增加。
化学相容性
RC膜具有良好的化学耐受性。温度、浓度、暴露时间及其它因素的变化可能会影响膜的使用。您可以根据您的应用条件,在使用前对膜进行测试。膜可以耐受以下物质:卤代烃、醇类、酮类、酯类、氧化物以及含氮溶剂。不推荐用于>25%盐酸、硝酸及高氯酸;96%硫酸;1 N氢氧化钾以及10%苯酚。具体请参考化学相容性表。
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